Frontalkrocken skedde mellan två personbilar - i den ena satt en man och en kvinna, i den andra satt en man.
- Kvinnan är avliden, säger Torbjörn Karlsson, vakthavande befäl vid Uppsalapolisen.
En av männen uppges vara allvarligt skadad, den andre är lindrigt skadad, uppger polisen strax efter klockan 14. De inblandade fördes med helikopter och ambulans till Akademiska sjukhuset.
Enligt polisen ska olyckan ha skett vid en omkörning på vägen.
- Det är våra initiala uppgifter. En bil ska ha gjort en omkörning och sedan inte kört in i sitt eget vägfält, säger Torbjörn Karlsson.
Enligt SOS Alarm gick det inte att få kontakt med två av personerna efter olyckan - som skedde strax norr om Åkerby kyrka. Larmet kom strax efter klockan 11.30 på torsdagen.
Det var totalstopp i trafiken på vägen efter olyckan.