Olyckan skedde i norrgående riktning strax utanför Uppsala på E4 då en bilist körde in i en bärgningsbil som arbetade på platsen.
Polis och räddningstjänst larmades till platsen och kvinnan som körde bilen fick föras med ambulans till Akademiska sjukhuset i Uppsala, då med oklart skadeläge.
Vid 21-tiden på kvällen meddelade polisen att kvinnan avlidit av sina skador. Inga andra ska ha skadats i samband med olyckan och kvinnan färdades ensam i bilen.
Bilen är tagen i beslag och en teknisk undersökning kommer att genomföras.