Vid 15-tiden på söndagseftermiddagen inträffade en singelolycka vid Giresta, cirka 4 kilometer sydost om Örsundsbro.
Fyra personer ska ha färdats i fordonet varav tre blev allvarligt skadade. De tre personerna fördes med ambulans till Akademiska sjukhuset i Uppsala.
Sent på söndagskvällen kom uppgifter om att 16-åringens liv inte gick att rädda. Pojkens anhöriga är underrättade.
Enligt Uppsalapolisen finns uppgifter om att bilen hade rullat av vägen.
Enligt TT ska även två flickor, 14 och 15 år, ha funnits i fordonet. De skadades, men inte allvarligt. De tre ungdomarna fördes till Akademiska sjukhuset i Uppsala där 16-åringen förklarades avliden.
Fordonet har tagits i beslag för teknisk undersökning. Det ska finnas flera vittnen till händelsen.